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基于表面張力下取向微納米纖維的優化制備及應用
來源:賈琳 瀏覽 553 次 發布時間:2022-10-27
靜電紡絲是制備納米纖維最簡單易行的方法,靜電紡納米纖維具有較大的比表面積,較高的孔隙率以及可控的納米纖維直徑等特征。因此受到了越來越多的關注,被應用到增強復合材料,過濾膜,傳感器,藥物緩釋和組織工程等各個方面。但是目前應用的隨機排列的納米纖維強度較低,在很大程度上限制了納米纖維的應用。靜電紡取向納米纖維可以有效地提高納米纖維的機械強度,而且取向的納米纖維形態可以引導藥物和蛋白等的定向釋放,引導細胞的定向生長,在藥物釋放和組織工程方面有更加廣闊的應用。
本文在前人研究的基礎上,分析靜電紡過程中射流的受力,研究溶液的表面張力對靜電紡射流的形成和拉伸的影響。然后在射流拉伸分析的基礎上,研究射流的運動,并通過自行設計的裝置控制射流的運動,制備取向的納米纖維。最后研究取向的納米纖維在血管組織工程方面的應用。
本文首先利用質量守恒定律,電荷守恒定律和動量守恒定律分析靜電紡射流的受力,從理論方面研究溶液的表面張力對靜電紡射流形成和拉伸的影響。結果表明溶液的表面張力與射流形成的臨界電壓之間的關系為Φc~γ;射流的半徑R與射流距離截取點之間的縱向距離z之間的關系為:R-Cz-1/2+C1其中C是關于溶液表面張力的一個常數。然后在聚乙烯醇(PVA)中加入了不同含量的陰離子表面活性劑,降低溶液的表面張力,從實驗方面驗證溶液的表面張力對射流形成和拉伸的影響。
實驗結果與理論分析的結果是一致的,即射流形成的臨界電壓與溶液的表面張力成一個正比例的關系,溶液的表面張力越小,射流形成的臨界電壓越小。溶液的表面張力對射流的拉伸沒有影響,不同的表面張力下,射流的直徑與縱向距離之間的關系都是R~z-1/2;但是溶液的表面張力對射流的直徑有很大的影響,即溶液的表面張力越小,射流的直徑越小。為了進一步研究溶液的表面張力對靜電紡納米纖維性能的影響,本文還在PVA溶液中加入了不同種類(陽離子,陰離子,非離子和兩性表面活性劑)不同含量的表面活性劑,研究表面活性劑對溶液性質以及納米纖維形態和性能的影響。
結果表明當表面活性劑的含量小于1%時,PVA溶液的表面張力會隨著表面活性劑含量的增加而減小;PVA溶液的粘度會隨著陽離子和陰離子表面活性劑含量的增加而增加;除了非離子表面活性劑,在PVA溶液中加入其它三種表面活性劑都會有效地增加PVA溶液的電導率。另外,在PVA溶液中加入表面活性劑,可以有效地降低納米纖維的直徑,當加入1%的非離子表面活性劑以后,納米纖維的直徑從405nm降低到了100nm。而且納米纖維的熱學性能和結晶度都隨著表面活性劑的加入而提高了。在分析射流拉伸運動的基礎上,本文利用麥克斯韋電場方程以及電荷之間的庫倫斥力研究納米纖維取向排列的機理。平行電極對納米纖維產生的附加電場改變了接收裝置的靜電場分布,根據最低能量定理,納米纖維最終將沿著與電極垂直的方向取向排列。由于沉積下來的納米纖維還帶有一些電荷,已經沉積的納米纖維對剛沉積下來的納米纖維有一個庫倫斥力,納米纖維之間存在的庫倫斥力進一步增加纖維的取向排列。
在理論分析的基礎上,改進現有的靜電紡設備,通過引入輔助電極,自行設計了平行金屬板和滾筒平行電極等取向納米纖維的收集裝置。兩塊平行排列的金屬板相當于一個電容,將兩塊金屬板接相同的負電壓,在靜電紡過程中,兩塊金屬板會同時對射流有一個相同的拉伸力,納米纖維最終將沿垂直于金屬板的方面取向沉積下來。而滾筒平行電極組合收集裝置不僅可以提高納米纖維的收集面積,而且通過改變滾筒和平行電極的位置,還可以制取取向方向不同的分層的取向納米纖維。利用平行金屬板收集裝置和平行電極滾筒組合的收集裝置進行靜電紡絲,收集取向排列的PVA和聚乳酸(PLLA)納米纖維。
最后本文還利用Ansoft Maxwell電磁場模擬軟件,模擬平行金屬板裝置和滾筒平行電極組合裝置的電場強度分布,從電場方面驗證了納米纖維在平行金屬板收集裝置和滾筒平行電極組合收集裝置中的取向排列。人體的許多組織,例如神經組織,肌肉組織和心臟組織中,其微觀結構都是高度取向的。在血管組織工程中,平滑肌細胞(SMCs)沿血管壁中間膜的取向排列是本體動脈血管的一個關鍵特征,取向的聚合物納米纖維可以被用作細胞外基質(ECM)的替代材料,為細胞的粘附生長提供支架材料和機械強度,并通過納米纖維的形態調節細胞的生長行為。本論文利用靜電紡絲的方法制備非取向和取向排列的聚氨酯(PU)和混合的聚氨酯/膠原蛋白(PU/Coll)納米纖維,用作血管組織工程的支架材料,研究取向納米纖維對引導細胞取向生長的作用。
由于靜電紡過程中旋轉的滾筒所產生的拉伸力,取向的納米纖維的直徑略小于非取向的納米纖維,取向的納米纖維還具有各向異性的親水性能和力學性能,其性能特征與血管ECM的微觀結構更相似。在PU和PU/Coll納米纖維表面培養SMCs,結果表明:膠原蛋白的嵌入有效地提高了SMCs的增殖率,取向的PU/Coll納米纖維通過纖維的接觸引導作用促使了SMCs的取向生長,且SMCs的延伸的紡錐形態與體內的SMCs的紡錐形態更接近。培養在取向的PU/Coll納米纖維表面的SMCs表現出了較強的,均勻的,取向的SMA和MHC蛋白表達。取向的PU/Coll納米纖維具有更小的直徑,各向異性的親水性和力學性能,還可以促使SMCs的取向生長,提高SMCs的蛋白表達,是更好的血管組織工程支架材料。血管內皮細胞(ECs)是血管壁中一種非常重要的細胞,在血管支架材料表面培養內皮細胞(ECs)將賦予了支架的抗血栓性,有效地阻止血管支架的血栓形成,提高血管移植物的成功率。但是ECs是一種成熟的細胞,其增殖能力有限,間充質干細胞(MSCs)是一種多功能干細胞,具有強大的增殖能力和多向分化潛能,在適宜的體內或體外環境下可分化為血管內皮細胞。因此研究MSCs向ECs的分化對于血管組織工程具有非常重要的意義。
本文制備取向的聚乳酸(PLLA)和混合的聚乳酸/膠原蛋白(PLLA/Coll)納米纖維,進一步研究取向的納米纖維形態對MSCs向ECs的分化的影響。取向的PLLA/Coll納米纖維具有更小的納米纖維直徑,各向異性的親水性和機械性能,與血管壁ECM的微觀性能更接近。在非取向和取向納米纖維支架表面培養MSCs,發現培養在取向的PLLA/Coll納米纖維表面的MSCs表現出來取向的鵝卵石形態,與體內的內皮細胞的形態最接近。蛋白染色結果表明培養在取向納米纖維表面的MSCs顯現出了更強的ECs的特征蛋白CD31和vWF,取向的納米纖維形態有效地提高了MSCs的增殖率和向ECs方向的分化。較好的機械性能,特殊的納米纖維形態以及各向異性的親水性能等賦予了取向納米纖維更廣的應用范圍,本文首先從理論上分析靜電紡射流的受力,控制射流的運動,進而通過自行設計的接收裝置制備取向的納米纖維,并將取向的納米纖維應用到血管組織工程中,為進一步擴寬取向納米纖維的應用奠定了基礎。